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Stellaris RNA FISH Probes

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What is Stellaris RNA FISH?

LGC Biosearch 사의 Stellaris RNA FISH (fluorescence in situ hybridization)는 세포 수준에서 개별 mRNA molecule의 동시 검출, 위치, 정량화를 가능하게 하는 RNA 시각화 방법입니다.
이 기술을 통해 RNA 발현의 이미지를 얻을 수 있습니다. Sensitivity와 specificity가 높기 때문에 거짓 양성 반응을 최소화합니다.
Stellaris RNA FISH probe는 부분적으로 degrade된 target mRNA에도 결합이 가능하기 때문에 FFPE 조직 샘플에 매우 적합합니다.
또한 멀티 플렉스 분석을 통해 여러 유전자의 발현 수준의 상관 관계를 확인하거나, control과 표적 유전자를 동시에 확인할 수 있기 때문에 시간을 절약할 수 있습니다.

제품 특징

• qPCR, DNA FISH, IHC(면역 조직 화학) 및 Western Blotting 의 기존 기술과 결합하여 보완적인 정보의 제공이 가능합니다.
• 분리, 정제 및 증폭이 필요 없이 RNA를 직접적으로 검출하고 시각화 할 수 있습니다

Stellaris protocol

Stellaris RNA FISH 프로토콜은 간단하며 아래 이미지와 같이 네 가지 주요 단계로 구성됩니다.
일부 샘플 유형의 경우 전체 프로세스를 하루 이내에 완료할 수 있습니다.

Step A: Prepare a sample
A sample is grown, adhered to, or sectioned onto a #1 cover glass and permeabilized with alcohol. No protease is required!

Note: Variations in sample preparation between different organisms and sample types are covered in our online Stellaris protocols.

Step B: Hybridize probes
Hybridization can be completed in 4 to 16 hours at +37 °C in a standard laboratory incubator.

Step C: Wash the sample
Removal of the Hybridization Buffer and the addition of wash buffers with short incubation periods can remove excess probes. The total time for this step is 1-1.5 hours.

Step D: Image sample
The sample is ready for imaging using a standard fluorescence microscope. We recommend using a wide-field fluorescence microscope though other imaging platforms can be used with Stellaris RNA FISH probes. Image processing is done using available online tools which convert Z-stack images to a maximum-intensity projection image.

Multiplexing

Stellaris RNA FISH 프로브는 LGC, Biosearch Technologies의 CAL Fluor™ 및 Quasar™ 염료를 포함하여 가시 스펙트럼의 다양한 형광단에서 사용할 수 있으며 다중 분석에 사용할 수 있습니다.
다중 분석에서 염료 선택은 주로 이미징 플랫폼에서 사용할 수 있는 필터에 의해 결정되지만 최소한의 스펙트럼 중첩으로 리포터 염료로 레이블이 지정된 DAPI 핵 염색 및 3개의 Stellaris RNA FISH 프로브 세트를 포함하는 분석을 설계하는 것이 확실히 가능합니다.
사용 가능한 모든 염료 및 변형에 대한 자세한 정보와 멀티플렉싱 가이드는 Stellaris dyes and modifications 페이지를 참조하십시오.

Stellaris RNA FISH는 qPCR, DNA FISH, IHC (immunohistochemistry), IF (immunofluorescence) and western blotting 과 같은 기존 기술과 결합하여 보완적인 정보를 제공할 수 있습니다.

How to order

Design your own Custom Probe Sets using our online Stellaris Probe Designer, free with registration.
Follow the guidelines for sequence requirements on one of our Stellaris Tech Blogs: Designing Stellaris RNA FISH Probes Part I: Increasing Probe Count.

Finally, don’t forget to order a set of our Stellaris Buffers which enhance the signal and reduce background.

당사는LGC Biosearch 사의 Kit를 판매하거나 실험 대행을 진행하는 것은 아니고,
디자인 해 주시는Stellaris RNA FISH Probe와 FISH에 필요한 Hybridization & Wash Buffer를 판매하고 있습니다.

Stellaris RNA FISH Probe를 처음 제작하시는 거라면 Biosearch 홈페이지에서 Stellaris RNA FISH Probe Designer 가입 후 쉽게 제작 가능합니다.
https://www.biosearchtech.com/Account/Login?return=/stellaris-designer

참고로 Probe Designer로 짜여진 Oligo 길이는 약 20mer 정도로 하고 Probe 갯수는 최소 25개 최대 48개로 제작되어야 합니다.
그러기 위해서는 Target Oligo Length 약 1kb 정도 되어야 합니다. Probe 갯수는 48개 미만에서 많을수록 Target Detection효율이 좋습니다.

정확인 견적은 맨 아래 첨부해 드리는 주문서 양식을 채워 보내주시면 검토 후 리턴해 드리겠습니다.

Resources

Document

제품 자료 Stellaris getting started guide.pdf Upload date: 2022.11.29
주문 시트 Stellaris FISH Probes order form.xls Upload date: 2022.11.29