DNA Fragmentation Detection Kit

제품소개

Exalpha의 DNA Fragmentation Detection Kit는 apoptotic endonuclease에 의해 단편화된 DNA를 말단표지법을 통해 조직화학적으로 검출하는 Apoptosis kit 입니다.
이 키트를 사용하면 paraffin-embedded tissue나 냉동 조직 절편 또는 슬라이드에 고정된 단일 세포 현탁액에서 apoptotic nuclei를 인식할 수 있습니다.

이 키트는 연구용으로만 사용되어야 하며 진단이나 치료 과정에는 사용할 수 없습니다.
This assay is for research use only and not for use in diagnostic or therapeutic procedures.

Related brand: Nordic, Exalpha, Gallus, MUbio, Biologo, ADG, ELTI, Scicons, Bii

Background

세포의 죽음은 괴사(necrosis)와 세포사멸(apoptosis)의 두 가지 주요 메커니즘에 의해 발생합니다.
Apoptosis는 또한 programmed cell death 또는 Anoikis [anchorage-dependent cell이 주변 세포외 기질(ECM)에서 분리될 때 발생]로도 알려져 있습니다.

Apoptosis는 주변에 유해 물질을 방출하지 않고 세포를 제거합니다.
그러나 너무 적거나 너무 많은 세포의 죽음은 많은 질병에 관여합니다.
세포사멸이 부적절하게 기능하면 제거되어야 하는 세포가 생존하게 되어 암이나 백혈병과 같은 질병을 유발하게 됩니다.
반대로 세포사멸 기작이 과도하게 잘 작동하면 너무 많은 세포가 ‘죽을’ 수 있으며 그 결과 심각한 조직 손상이 발생할 수 있습니다.
뇌졸중 및 알츠하이머병, 헌팅턴병 및 파킨슨병과 같은 신경퇴행성 질환의 경우입니다.

‘Apoptosis’라는 용어는 사멸과정 자체가 아닌 프로그램 된 세포 사멸 과정에서 세포가 겪는 구조적 변화만을 나타냅니다.

괴사로 인한 세포 사멸은 세포에 대한 손상이나 외상으로 인해 발생하는 반면, 세포사멸은 정상적인 세포 발달 중에 발생하는 에너지 의존적 메커니즘입니다.
괴사는 세포 용해를 초래하는 반면, 세포사멸은 형태학적으로 세포 수축, 핵농축, 염색질 응축 및 원형질막의 수포를 특징으로 합니다.

Principle of the Assay

이 키트를 이용한 분석에서 Terminal deoxynucleotidyl Transferase(TdT)는 세포 사멸 신호에 반응하여 생성된 DNA 단편의 노출된 3′-OH 말단에 결합하고 Biotin-labeled deoxynucleotides를 추가 할수 있게 합니다.
비오틴화된 뉴클레오티드는 streptavidin-horseradish peroxidase (HRP) 접합체를 사용하여 검출됩니다.
Diaminobenzidine (DAB)은 HRP 표지 샘플과 반응하여 DNA 단편화 부위에 불용성 갈색 substrate를 생성합니다.

이러한 방법으로 apoptosis의 조직학적 분포나 각각의 세포를 효율적으로 검출할수 있으며,
Methyl Green을 사용한 비교염색으로 정상 세포와 사멸 세포의 형태학적 분석과 characterization을 수행할 수도 있습니다.

이 방법은 조직단편, 고정세포 등 다양한 시료에 사용할 수 있고, 형광현미경, 광학현미경, flow cytometry로도 관찰이 가능합니다.

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